體式顯微鏡是一種高分辨率、高放大倍數(shù)的顯微鏡,適用于生物學(xué)、材料科學(xué)等領(lǐng)域的研究。校準(zhǔn)體式顯微鏡是確保其成像質(zhì)量和準(zhǔn)確性的關(guān)鍵步驟。
第一步:調(diào)整標(biāo)本臺(tái)高度
在開始校準(zhǔn)體式顯微鏡之前,需要先調(diào)整標(biāo)本臺(tái)高度。將一個(gè)已知厚度的標(biāo)準(zhǔn)載玻片放在標(biāo)本臺(tái)上,然后通過(guò)目鏡觀察,在不改變鏡頭焦距的前提下,使用升降機(jī)械或旋鈕調(diào)整標(biāo)本臺(tái)的高度,直到載玻片清晰可見(jiàn)。
第二步:調(diào)整照明系統(tǒng)
接下來(lái)需要調(diào)整照明系統(tǒng)。打開熒光燈或激光器,并將亮度調(diào)至最佳水平。檢查濾光片是否正確安裝,并確保其緊固。
第三步:對(duì)焦調(diào)節(jié)
接著需要進(jìn)行對(duì)焦調(diào)節(jié)。對(duì)焦調(diào)節(jié)可以通過(guò)移動(dòng)物鏡或目鏡來(lái)實(shí)現(xiàn)。如果你使用的是傾斜物鏡,那么需要將其旋轉(zhuǎn)至垂直狀態(tài)。隨后將樣品置于載玻片上,并在低倍鏡下找到合適的聚焦位置。然后將目鏡聚焦至最清晰的位置,最后再通過(guò)高倍鏡進(jìn)行微調(diào)。
第四步:調(diào)整放大倍數(shù)
接下來(lái)需要調(diào)整放大倍數(shù)。將樣品移動(dòng)至圖像的中心并使用目鏡觀察樣品。根據(jù)需要旋轉(zhuǎn)物鏡,選擇所需的放大倍數(shù)。請(qǐng)注意,放大倍數(shù)越高,對(duì)焦和調(diào)整其他參數(shù)就越困難。
第五步:校準(zhǔn)目鏡刻度
為了精確量測(cè)樣品,需要校準(zhǔn)目鏡刻度。將一個(gè)已知尺寸的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)放置在載玻片上,并調(diào)整標(biāo)本臺(tái)高度使其清晰可見(jiàn)。然后通過(guò)目鏡觀察標(biāo)準(zhǔn)并記錄其實(shí)際大小。使用顯微鏡軟件或手動(dòng)計(jì)算器將標(biāo)準(zhǔn)分成若干等分,并記錄每個(gè)刻度的長(zhǎng)度。這些數(shù)據(jù)可以用于以后的測(cè)量。
第六步:校準(zhǔn)物鏡刻度
最后需要校準(zhǔn)物鏡刻度。將一根已知長(zhǎng)度的標(biāo)準(zhǔn)桿放置在標(biāo)本臺(tái)上,調(diào)整標(biāo)本臺(tái)高度使其清晰可見(jiàn)。使用目鏡觀察標(biāo)準(zhǔn),并記錄其實(shí)際長(zhǎng)度。然后使用顯微鏡軟件或手動(dòng)計(jì)算器測(cè)量在當(dāng)前放大倍數(shù)下標(biāo)準(zhǔn)桿的長(zhǎng)度。將此長(zhǎng)度除以實(shí)際長(zhǎng)度,即可得到物鏡的校準(zhǔn)因子。